Визначення чистоти препарату ДНК або РНК Відношення поглинання при довжинах хвиль 260 нм та 280 нм (260нм/280нм) показує чистоту препарату ДНК чи РНК. Препарат вважається чистим, якщо відношення значень 260нм/280нм приблизно дорівнює 1.8 для ДНК і 2.8 для РНК.
У цій статті розглядаються найпоширеніші та прогресивніші методики, що використовуються для екстракції нуклеїнових кислот
- Виділення фенол-хлороформом
- Виділення на спин-колонках
- Виділення на магнітних частках
- Розумне виділення (Smart Extraction)
- Ферментативне температурно-залежне виділення
ДНК беруть в облогу з використанням холодного етанолу, а потім розчиняють у Трис-ЕДТА (ТІ) буфері або деіонізованої води.
Для ефективного відділення високомолекулярної ДНК від РНК спочатку проводиться фенольна екстракція, а потім дві фенолхлороформні екстракції для одночасного видалення білків і ліпідів з розчину, що містить нуклеїнові кислоти.