Як визначити чистоту ДНК?

Визначення чистоти препарату ДНК або РНК Відношення поглинання при довжинах хвиль 260 нм та 280 нм (260нм/280нм) показує чистоту препарату ДНК чи РНК. Препарат вважається чистим, якщо відношення значень 260нм/280нм приблизно дорівнює 1.8 для ДНК і 2.8 для РНК.

У цій статті розглядаються найпоширеніші та прогресивніші методики, що використовуються для екстракції нуклеїнових кислот

  • Виділення фенол-хлороформом
  • Виділення на спин-колонках
  • Виділення на магнітних частках
  • Розумне виділення (Smart Extraction)
  • Ферментативне температурно-залежне виділення

ДНК беруть в облогу з використанням холодного етанолу, а потім розчиняють у Трис-ЕДТА (ТІ) буфері або деіонізованої води.

Для ефективного відділення високомолекулярної ДНК від РНК спочатку проводиться фенольна екстракція, а потім дві фенолхлороформні екстракції для одночасного видалення білків і ліпідів з розчину, що містить нуклеїнові кислоти.